荧光定量检测服务(以荧光定量PCR为例)是一种基于实时荧光信号监测的核酸定量分析技术,广泛应用于病原体检测、基因表达分析、肿瘤研究、药物疗效评估等领域。
荧光定量检测服务通常包括以下环节:
样本处理:
接受新鲜或保存完好的细胞(≥5×10⁶)、动植物组织(≥50mg)、血液(300μL)等样本。
提供基因组DNA、纯化总RNA或反转录cDNA(OD260/OD280比值在1.9-2.1之间)。
实验设计:
根据客户需求设计引物和探针,或使用客户提供的序列信息。
确定检测模式(绝对定量/相对定量)和对照设置(阳性对照、阴性对照、内参基因等)。
PCR检测:
使用专业荧光定量PCR仪(如罗氏LightCycler PRO,配备7重检测通道,支持28种检测模式)进行扩增反应。
实时监测荧光信号,生成扩增曲线和Ct值数据。
数据分析:
通过标准曲线或ΔΔCt法计算目标基因的表达量或拷贝数。
提供原始数据、扩增曲线图及详细分析报告。